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克隆用T载体

  • 货  号:
    K06020V
  • 规  格:
    20μl
  • 价  格:
    ¥270
  • 描  述:
    常规TA克隆T载体,不能直接表达
产品说明
克隆用T载体

pBAT-1载体是高效克隆T载体,线性化载体3’-末端含有突出的碱基“T”,可以将3’-末端含有“A”的PCR扩增产物高效率的连接至pBAT-1载体上。本试剂盒中含有的高效连接液Ligation Mixture可以方便的将载体和外源片段进行高效连接,反应产物可以直接用于转化。
标签的蛋白。该融合蛋白可以用His6标签进行亲和纯化,还可以用抗c-myc标签的抗体进行检测。

产品特色
一步法完成基因克隆与表达载体的构建,所得到的阳性质粒载体可以直接用于表达。节约时间、节约成本。

成分
pBAT-7 (70ng/μl)    20μl   1支
Plbu                  150μl    1支
PNETR                 150μl    1支

保存条件
保存温度:-20 ℃
有效期:12个月

使用方法
1、按照连接酶的说明书设置连接反应体系,进行连接反应。                                       
2、将连接反应产物加入100μl感受态细胞中,冰水浴放置30分钟。                       
3、迅速置于42℃水浴热激2分钟,迅速在冰水浴放置2分钟。
4、加入900μl 2YT(或LB)培养基,37℃,180rpm振荡培养45分钟。高速离心收集菌体,去掉800μl上清,留200μl重悬细胞。
5、将200μl细胞重悬液涂布在含有相应抗生素的琼脂平板培养基上,37℃倒置培养过夜,形成单克隆。
6、挑取单菌落,鉴定阳性克隆。

注意事项
1、Ligation Mixture溶液请于冰水浴中溶解,混匀后再使用。
2、连接反应请在16℃以下进行,温度升高较难形成环状DNA。连接时间控制在4℃反应过夜或者16℃反应2小时至4小时。对于较难连接的反应,可以4℃过夜和16℃连接2小时交替连接。反应时间过短或者温度高较难筛选得到阳性克隆。
3、为提高克隆鉴定的效率,本试剂盒提供了载体上游引物和载体下游引物,以便于用菌落PCR鉴定阳性插入克隆时使用。也可用作测序引物。

产品目录
 货号  产品名称  规格  报价(元)
 K06020A  克隆用T载体试剂盒  20μl  400
 K06020V  克隆用T载体  20μl  270