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重组人纤维连接蛋白片段(Fibronectin)

  • 货      号:
    P06001B
  • 规      格:
    500μg
  • 价      格:
    ¥1190
  • 描      述:
    人纤维连接蛋白(Fibronectin)包括细胞结合域,肝磷脂结合域和CS1位点三个功能区域。它由574个氨基酸组成,分子量63kDa。
产品说明

Fibronectin(重组人纤维连接蛋白)介绍

重组人纤维连接蛋白片段(Recombinant human fibronectin fragment,以下简称Fibronectin)为一段人工重组多肽,由574个氨基酸组成,分子量为63kDa

Fibronectin(重组人纤维连接蛋白)包括三个功能区:

1. C-Domain(central cell-binding domain),含RGD序列:为细胞粘附区域;
2. H-Domain(heparin-binding domain):为病毒粘附区域;
3. CS-1:为细胞粘附区域。

 

Fibronectin(重组人纤维连接蛋白)应用

 

1.提高逆转录病毒、慢病毒的感染效率
 
Fibronectin的三个功能区中:有两个细胞粘附区域(C-Domain和CS-1)和一个病毒粘附区域(H-Domain),这样Fibronectin就能将细胞和病毒拉近,从而提高病毒感染效率。Fibronectin包被在细胞板或细胞瓶表面后,显著性地提高反转录病毒介导的基因感染到哺乳动物细胞里面的能力。
 
作用原理如下:
细胞表面VLA-4及VLA-5可分别与Fibronectin上的CS-1 位点及C-Domain(central cell-binding domain)结合,逆转录病毒载体可以与H-Domain(heparin-binding domain)结合。在经Fibronectin包被的培养容器表面,细胞与病毒载体以高浓度共存,从而提高基因感染效率30~70%。

 

2.刺激细胞获得上千倍的增殖

Fibronectin和抗CD3抗体可分别与T淋巴细胞上的VLA和TCR结合, 两者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通过Ras途径刺激T细胞的增殖和分化,使其获得上千倍的增殖。 
研究还证明,Fibronectin能提高细胞的融合率,缩短融合周期,可应用于许多科研中,如应用于细胞杂交瘤技术等。将Fibronectin涂到微球载体上作为细胞大量生产的介质,可以节省空间,节省原材料,成为应用培养细胞技术来生产新药品的基础物质。

 

3.培养容器表面包被以增加细胞贴壁效果

重组人纤维连接蛋白(Fibronectin)的很多功能中,zui基本zui重要的一项是促进细胞的黏连生长,而细胞的黏连是机体结构得以维持、细胞生长完成的必要条件。因此,Fibronectin是细胞培养基的重要成分之一。研究结果表明:Fibronectin作为细胞培养的基质,可以使多种细胞的贴壁率达到90%以上(对照组为10%),细胞形态结构良好,细胞的代谢率增强,DNA、RNA及蛋白质合成速度提高约5倍,细胞的集落率升高几倍,原代培养的成活率明显提高,细胞生长时间缩短,这对建立人体疾病的体外模型是非常有益的。

 

Fibronectin(重组人纤维连接蛋白)产品特点

1. 纯化自重组  E.coli 菌株,其中携带有编码人纤维连接蛋白片段的质粒;
2. 无血清无动物来源;
3. 内毒素水平:<1Eu/μg;
4. 纯度:SDS-PAGE >95% 。


Fibronectin(重组人纤维连接蛋白)使用方法

Fibronectin包板:
1. 按5μg/cm2包被面积计算Fibronectin用量,将蛋白母液用生理盐水稀释到20-100μg/ml;
2. 加入到被包被容器使液体覆盖满表面,室温2h;
(注:24孔板 0.5毫升每孔;6孔板或35毫米皿 2毫升/孔;请不要用预处理过的培养器皿。)
3. 移除Fibronectin,用2%重组白蛋白或白蛋白继续包被30min;
4. 去除白蛋白包被液,用生理盐水洗板一次,直接使用或4℃一周内使用。
 
病毒转染:
1. 按125-250μl/cm2将病毒上清加入到Fibronectin包被好的板上;37℃ 4-6h,使病毒充分吸附;
(注:当病毒滴度较低时,可在加入病毒后1000-2000g,32℃离心2h。)
2. 将靶细胞按0.5-2.5x104/cm2密度加入到前面处理好的板中,37℃培养2-3d。
(注:当病毒滴度较高时,可直接将病毒与细胞混合并按合适的密度加入到Fibronectin包被的板中培养。)

 
人纤维连接蛋白保存条件
-20℃  
 
注意事项
1. 分装,保存于-20℃,避免反复冻融;  
2. 产品稀释后应立即使用,不宜长时间保存;  
3. 仅供科研使用,不能应用于人体。

产品目录及报价
 货号  产品名称  规格  报价(元)
 P06001A  重组人纤维连接蛋白片段(Fibronectin)  250μg  690
 P06001B  重组人纤维连接蛋白片段(Fibronectin)  500μg  1190
 P06001C  重组人纤维连接蛋白片段(Fibronectin)  2.5mg  4950